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　　[摘要] 目的 調查分析醫院2012～2013年銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌的臨床分布及耐藥性，為臨床合理使用抗菌藥物和及早預防和控制醫院感染提供科學依據。 方法 回顧性統計2012年1月～2013年12月嘉興地區兩所綜合性三甲醫院中分離的銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌的臨床資料，進行耐藥性分析。 結果 銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌分離率以痰液最高，分別占68.35%和81.79%;科室分布銅綠假單胞菌以呼吸內科為主(17.65%)，鮑曼不動桿菌以ICU為主(19.03%);銅綠假單胞菌對亞胺培南和美洛培南的耐藥率呈逐年上升趨勢，分別從8.45%、8.09%上升到13.10%、11.16%;鮑曼不動桿菌對頭孢吡肟、亞胺培南、美洛培南、頭孢哌酮/舒巴坦、左氧氟沙星等抗菌藥物耐藥率為19.36%～32.80%，對氨曲南、頭孢曲松的耐藥率達90%。 結論 銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌是醫院最常見的條件致病菌，臨床應加強耐藥性監測，減少多重耐藥菌的產生，避免院內感染和暴發流行。

　　[關鍵詞] 銅綠假單胞菌;鮑曼不動桿菌;抗菌藥物;耐藥性

　　銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌屬于非發酵革蘭陰性菌，是目前醫院感染的主要條件致病菌，也是非發酵菌屬中分離率最高的兩種細菌。近年來隨著臨床抗菌藥物的廣泛使用以及各種侵入性操作的增多，使銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌的多藥耐藥和泛耐藥菌株不斷增加，給醫院感染控制和臨床抗感染治療帶來極大困難。為更好地指導臨床合理使用抗菌藥物，筆者對2012～2013年嘉興地區兩所綜合性三甲醫院銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌的臨床分布及耐藥性進行回顧性調查與分析，現報道如下：

　　1 資料與方法

　　1.1 菌株來源

　　來自2012年1月1日～2013年12月31日嘉興地區兩所綜合性三甲醫院各類臨床送檢標本，包括痰液、分泌物、尿液、膽汁、胸腹水、血液、導管、腦脊液等。

　　1.2 病原菌鑒定與藥敏試驗

　　病原菌鑒定與藥敏采用法國梅里埃公司VETIK-2 Compact全自動細菌鑒定儀，及其配套GP、GN、GP-67、GN-16、GN-13鑒定和藥敏卡。分離與鑒定參照《全國臨床檢驗操作規程》進行。藥物敏感試驗結果判讀參照美國臨床實驗室標準化委員會(CLSI)每年更新內容進行判讀。

　　1.3 質控菌株

　　大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC-27853、金黃色葡萄球菌 ATCC29213、糞腸球菌ATCC 29212和肺炎克雷伯菌ATCC70063，購自原衛生部臨床檢驗中心。

　　1.4 數據分析

　　采用WHO細菌耐藥性監測推薦的Whonet 5.6軟件進行耐藥性分析，剔除重復菌株。

　　2 結果

　　2.1 病原菌的標本分布

　　2012年1月～2013年12月兩家醫院各類標本共檢出1858株銅綠假單胞菌、1829株鮑曼不動桿菌，銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌均以痰液分離率最高，分別占68.35%和81.79%;其次為分泌物，占16.95%和8.26%;尿液，占5.17%和 3.66%。見表1。

　　表1 銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌標本來源分布及構成比[n(%)]

　　注：分泌物包括傷口分泌物和膿液

　　2.2 病原菌的科室分布

　　銅綠假單胞菌的科室分布以呼吸內科為主，占17.65%，其次為ICU、普外科、腫瘤科、神經外科，分別占15.98%、12.43%、6.40%和6.19%;鮑曼不動桿菌的科室分布以ICU為主，占19.03%，其次為兒科、呼吸內科、神經外科、普外科，分別占15.42%、12.47%、7.11%和6.83%。見表2。

　　表2 銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌科室分布及構成比[n(%)]

　　2.3 銅綠假單胞菌的耐藥率

　　銅綠假單胞菌對阿米卡星和妥布霉素耐藥率最低，僅為1.15%～3.02%，對頭孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、慶大霉素、亞胺培南、美洛培南、阿米卡星、妥布霉素耐藥率小于10%，對亞胺培南和美洛培南的耐藥率呈上升趨勢，分別從2012年的8.45%、8.09%上升到2013年的13.10%、11.16%;而對阿莫西林/克拉維酸和氨芐西林/舒巴坦的耐藥率高(>90%)。見表3。

　　2.4 鮑曼不動桿菌的耐藥率

　　鮑曼不動桿菌對妥布霉素、阿米卡星耐藥率較低，為6.18%～14.6%，對替加環素的耐藥性增長迅速，從2012年的2.20%上升到2013年的24.00%;對頭孢吡肟、亞胺培南、美洛培南、頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、環丙沙星、左氧氟沙星、復方新諾明、四環素和慶大霉素具有一定的耐藥性，耐藥率為19.36%～32.80%，而對氨曲南、頭孢曲松的耐藥率高(>90%)。見表4。

　　3 討論

　　3.1 銅綠假單胞菌感染的臨床分布及耐藥性

　　銅綠假單胞菌是一種需氧革蘭陰性桿菌，對周圍生存繁殖環境和營養要求不高，在醫院內潮濕環境和人體腸道可定植，引起抵抗力受損患者發生院內感染，可導致人體局部器官及全身性、多發性醫院感染[1]。近年來由于廣譜抗菌藥物、激素及免疫抑制劑的廣泛應用，各種侵入性診斷與治療操作的不斷普及，銅綠假單胞菌已成為醫院感染的重要病原菌之一，給臨床抗感染治療帶來了極大困難[2]，在免疫力低下的醫院獲得性肺炎患者中尤其多見[3]?；颊吒腥玖算~綠假單胞菌，尤其是多重耐藥或者廣泛耐藥菌株后，由于對抗菌藥物的敏感性差，治療困難，病情常常遷延不愈，嚴重時可導致銅綠假單胞菌膿毒癥，具有重癥性、難治性、持續反復性等特點，已經引起國內外專業人士的關注。

　　本研究結果顯示，銅綠假單胞菌最常見分離自呼吸道標本(68.35%)，其次為分泌物(16.95%)，與國內的報道一致[4-5]。科室分布內科以呼吸內科和ICU為主，分別占17.65%和15.98%，這些科室的患者多為老年患者或患病嚴重、住院時間長、免疫力低下，同時大量使用廣譜抗菌藥物造成菌群失調，致使銅綠假單胞菌繼發感染，藥物敏感的銅綠假單胞菌被殺滅，耐藥性菌株得以存活并成優勢菌群。外科則以普外科、腫瘤科、神經外科為主，分別占12.43%、6.40%和6.19%，因此加強消毒滅菌制度的落實，減少侵入性操作及合理使用抗菌藥物是預防銅綠假單胞菌的有效措施。

　　銅綠假單胞菌具有固有耐藥和獲得性耐藥，經常表現對β-內酰胺類、喹諾酮類、氯霉素類和磺胺類等抗菌藥物的多重耐藥，耐藥率呈逐年上升趨勢，且與抗菌藥物使用量存在相關性。銅綠假單胞菌是全球共識的多藥耐藥非發酵菌，共具有復雜的耐藥形成機制：①該菌能產生破壞抗菌藥物活性的多種滅活酶、鈍化酶和修飾酶;②基因發生突變使得抗菌藥物的作用靶位變化;③細胞外膜固有的微孔蛋白缺失及膜通透性降低;④細胞主動泵出機制使進入菌細胞的抗菌藥物排出菌體;⑤銅綠假單胞菌感染宿主后形成生物膜，可阻擋白細胞、各種抗體、抗菌藥物進入菌細胞內吞噬和殺滅細菌。攜帶不同耐藥質粒不同類型的銅綠假單胞在醫院內環境中大量繁殖、廣泛傳播，致使多藥耐藥銅綠假單胞菌的數量日益增多，耐藥率也逐年攀升[6]。本研究結果顯示，銅綠假單胞菌對阿莫西林/克拉維酸和氨芐西林/舒巴坦的耐藥率>90%，表明這類抗菌藥物已經不適于銅綠假單胞菌感染的治療。近年來以亞胺培南為主的碳青霉烯類抗菌藥物被視為控制革蘭陰性菌感染的強效藥物，在臨床經驗用藥中廣泛應用，使銅綠假單胞菌對亞胺培南和美洛培南的耐藥率呈上升趨勢。本研究結果顯示，銅綠假單菌對亞胺培南和美洛培南的耐藥率分別從2012年的8.45%、8.09%上升到2013年的13.10%、11.16%。由于抗菌藥物的不合理使用會增加銅綠假單胞菌適應性耐藥，因而臨床上應加強抗菌藥物最優劑量的管理，慎重、合理地使用碳青霉烯類抗菌藥物，密切關注銅綠假單胞菌耐藥性的發展，采用有效的感染控制措施。銅綠假單胞菌對頭孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌藥物較敏感，耐藥率為6.22%～9.85%，臨床常選擇其作為治療呼吸道感染的經驗性用藥。銅綠假單胞菌對阿米卡星和妥布霉素敏感，耐藥率僅為1.15%～3.02%，盡管這類藥物對銅綠假單胞菌抗菌作用良好，但由于其耳、腎毒性等不良反應，限制了其在臨床的應用，尤其是老年患者應慎用，一般不單用，常與β-內酰胺類抗生素聯合使用。

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